En la practica de hoy, hicimos cromatografía en capa delgada, probamos diferentes solventes para lograr la mejor corrida. La placa de silicagel venia con indicador de Fluorecencia- 254.
La finalidad de la corrida era la separación de: cortisol de corticosterona. Moléculas que se pueden visualizar más abajo, observándose que se diferencian solamente por un OH-
Para eso decidimos comenzar con una Sc. de 2 ml de Etanol y 0.2 de Agua, sembrando cada una en un lugar de siembra diferente, pero como resultado obtuvimos que ambas tienen el mismo RF
Luego probamos con 2 ml de Metanol y 1 ml de Agua, pensando en hacer más polar al solvente para que corra mas lento y quede más retenido en la placa de silicagel. El resultado de la misma fue positivo, lo sembrado no corrió con el frente pero el problema es que seguían teniendo el mismo RF.
Más tarde probamos con 1 ml de Aceto nitrilo y 2 ml de Metanol, obteniendo un resultado similar al de la solucion anterior pero con mayor distancia entre el frente del solvente y la corrida de la muestra.
Para finalizar y obtener el solvente definitivo de corrida, usamos una Sc. 86 % diclorometano 7% Metanol y 7% Aceto nitrilo. Los resultados obtenidos fueron ideales, se lograron separar las muestras y el RF obtenido fue excelente.
viernes, 18 de septiembre de 2009
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